注意事項:
. 接收到小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取物圖片,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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產品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取物圖片 | Mouse Eye: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells Derivatives | 來電可享受優(yōu)惠 |
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取物【Mouse Eye: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells Derivatives】
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取物圖片小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取物是從小鼠原代視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取的,小鼠原代視網(wǎng)膜色素上皮細胞從正常小鼠眼組織制備。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。?
LRP0 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA IHC-P 50 µg
ACBD7 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA IHC-P 50 µg
DMP 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
CALML3 抗體, 鼠單抗 FCM IF ICC/IF 50 µg
CD30 / TNFRSF8 抗體, 鼠單抗 FCM 50 µg
4-3-3 beta / YWHAB 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA WB IP 50 µg
ALK-6 / BMPRB 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
PDGFRa / CD40a 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
LTC4S 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
CD7 抗體, 兔單抗 WB IP 50 µg
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取物圖片小鼠IgG-DAB顯色試劑盒 kit 盒
牛IgG干粉 00mg 支
Bromphenol Blue 溴酚藍 5g 瓶
Boc-D-Tyrosine Boc-D- 70642-86-3 20mg
DiO-Ac-LDL DiO標記乙?;兔芏戎鞍?500ug 瓶
Araloside X 遼東楤木皂苷X 3449-90-6 20mg
Mayer’蘇木素染液(免疫組化) 0ml 瓶
Jatrorrhizine Hydrochloride 鹽酸藥根堿 960383-96-4 20mg
膠片 8×0 盒
Limonin 檸檬苦素 80-7-8 20mg
Bavachinin 補骨脂二氫黃酮甲 9879-30-2 20mg
培養(yǎng)步驟:
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取物圖片對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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