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小鼠活性氧(ROS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠活性氧(ROS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存保證產品質量,*,質量可靠,靈敏度高,效果穩(wěn)定。等優(yōu)點已經得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。
產品名稱:小鼠活性氧(ROS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱: ROS ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。
小鼠活性氧(ROS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠活性氧(ROS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
D-環(huán) * 0.g/支*2 加入250ml TSC瓊脂基礎中
戊烷脒瓊脂基礎 * 250 用于炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定
人前列腺成纖維細胞 英文名稱: HPrF 規(guī)格: 5 x 0^5 cells/vial
間充質干細胞培養(yǎng)基 英文名稱: MSCM 規(guī)格: 500 ml
比色法鈣分析試劑盒 英文名稱: CCA 規(guī)格: 250 tests/96 well plate
人毛外根殼細胞cDNA 英文名稱: HHORSC cDNA 規(guī)格: 20 reactions
人角膜細胞總RNA 英文名稱: HK tRNA 規(guī)格: 0 µg
原代神經膠質細胞特制基礎培養(yǎng)基 規(guī)格: 500/250/00ml
肺微血管內皮細胞 規(guī)格: 5 × 05次方(ml)
胎盤絨毛膜細胞 規(guī)格: 5 × 05次方(ml)
Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標記三聚氰胺 * 規(guī)格: 0.5ml
Gastrin 胃泌素(抗原) 進口/國產 規(guī)格: 0.5mg
BOb-(B-cell oct-binding protein ) B細胞特異性轉錄因子抗原 進口/國產 規(guī)格: 0.5mg TUSC 肺抑蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
COX4/COX IV- 氧化酶IV亞型抗體 規(guī)格: 0.2ml
NLRP0 富含重復結構域蛋白0抗體 規(guī)格: 0.2ml
Nogo-B/A 軸索過度生抑制因子-B/A抗體 規(guī)格: 0.ml
LIPK 脂肪酶家庭成員K抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/Gold 膠體金標記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.5ml
Aurora B/STK- 有絲分裂激酶B抗體 規(guī)格: 0.ml
小鼠活性氧(ROS)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存Integrin beta 6 整合素β6抗體(Integrin β6) 0.2ml
Phospho-HSP27 (Ser254) 磷酸化熱休克蛋白27抗體 規(guī)格: 0.ml
BRP44 腦蛋白44抗體 規(guī)格: 0.2ml
IFITM/CD225 干擾素誘導跨膜蛋白抗體 規(guī)格: 0.ml
C9orf86 9號染色體開放閱讀框86抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.ml
eIF4G 真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格: 0.ml