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小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP

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小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP 詳細資料

細胞處理:

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP
1) 凍存細胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP


小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP

商品屬性

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP

鑒定

STR鑒定正確

種屬

小鼠

生長特性

貼壁生長

細胞形態(tài)

上皮細胞樣

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

小鼠細胞系

 

商品介紹

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP

細胞別稱;4T1-LUC-EGFP;小鼠乳腺癌細胞-熒光素酶標記-綠色熒光蛋白;4T1-熒光素酶標記-綠色熒光蛋白

種屬來源;小鼠

組織來源;乳房

生長特性;貼壁生長

細胞形態(tài);上皮細胞樣

細胞代數(shù);10代以內(nèi)

背景簡介;Luciferase 4T1細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。4T1細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。4T1細胞是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥嘌噙抗性細胞株。

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP
(1)當(dāng)顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。

(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。

(5)細胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。

(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。

(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

(9)細胞凍存

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP


細胞接收后的處理:

小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠乳腺癌細胞;4T1-LUC-EGFP

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HumanComplemefragme3a,C3aELISAKit 人補體片斷3a(C3a)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

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植物脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒20

Humaestoterone,TELISAKit人睪同(T)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

豚鼠生長激素檢測試劑盒   豚鼠生長激素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠生長激素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠生長激素試劑盒、豚鼠生長激素eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

豚鼠內(nèi)皮型合成酶檢測試劑盒   豚鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒、豚鼠內(nèi)皮型合成酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

豚鼠內(nèi)皮素1檢測試劑盒   豚鼠內(nèi)皮素1試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠內(nèi)皮素1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠內(nèi)皮素1試劑盒、豚鼠內(nèi)皮素1eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

小鼠17羥孕檢測試劑盒   小鼠17羥孕試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠17羥孕試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:檢測試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠17羥孕試劑盒、小鼠17羥孕eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。


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