客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。在完成了初步的細胞觀察和評估后,客戶還需注意細胞的日常維護。對于貼壁細胞NCI-H460,應定期檢查培養(yǎng)基的顏色和透明度,確保營養(yǎng)充足且沒有污染跡象。如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變黃或渾濁,應及時更換新鮮培養(yǎng)基,并再次檢查細胞狀態(tài)。同時,維持培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定至關重要,包括溫度(通常為37°C)、濕度(95%以上)以及CO?濃度(通常為5%),這些參數(shù)直接影響細胞的生長和分裂。
此外,為了保持細胞的健康狀態(tài)和遺傳穩(wěn)定性,建議客戶遵循細胞的傳代周期進行操作,避免過度傳代導致細胞老化或特性改變。每次傳代時,記錄好細胞的傳代次數(shù)、培養(yǎng)條件以及任何觀察到的異常現(xiàn)象,這對于后續(xù)的實驗分析和數(shù)據(jù)解讀至關重要。
對于懸浮細胞,除了上述的離心和重懸操作外,還需注意細胞的均勻分布,避免細胞團塊形成,影響細胞生長和實驗結(jié)果的準確性。在細胞計數(shù)時,使用合適的計數(shù)板和方法,確保細胞密度的準確測量。
最后,客戶在使用NCI-H460細胞進行實驗前,應充分了解該細胞系的背景信息、生物學特性及實驗應用,以便更好地設計實驗方案,提高實驗的成功率和可靠性。同時,遵守實驗室的安全操作規(guī)程,確保個人安全和實驗環(huán)境的整潔有序。